水質及生活飲用水中糞大腸菌群的測定多管發酵法解析
為貫徹《中華人民共和國環境保護法》和《中華人民共和國水污染防治法》,保護生態環境,保障人體健康,規范水中糞大腸菌群的測定方法,制定本標準。本標準規定了測定地表水、地下水、生活污水和工業廢水中糞大腸菌群的多管發酵法。本標準是對《水質 糞大腸菌群的測定 多管發酵法和濾膜法(試行)》(HJ/T 347-2007)多管發酵法部分的修訂。
多管發酵法是一種用于檢測水樣中糞大腸菌群數量的標準化微生物學方法,其核心原理是利用大腸菌群能發酵乳糖產酸產氣的特性,通過分階段培養和觀察來實現定性和定量分析。該方法操作流程嚴謹,是水質監測中的重要手段。
根據現行國家生態環境標準,?《水質 糞大腸菌群的測定 多管發酵法》(HJ 347.2-2018)? 是當前適用于地表水、地下水、生活污水和工業廢水的方法,該標準于2019年6月1日起實施,替代了早期的試行標準?。
多管發酵法的操作流程主要分為以下三個相互銜接的部分:
?初發酵試驗?:將不同稀釋度的水樣接種至乳糖蛋白胨培養液中,在?37℃±0.5℃?條件下培養?24±2小時?。若培養管出現?產酸?(培養液由紫色變為黃色)和?產氣?(杜氏小管內有氣體積聚),則判定為初發酵陽性?。
?復發酵試驗?:將初發酵陽性的培養物轉移至?EC培養液?中,在?44.5℃±0.5℃?的恒溫水浴中繼續培養?24±2小時?。若再次產氣,則確認為糞大腸菌群陽性,此步驟通過提高溫度特異性地篩選出糞便來源的大腸菌群。
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平板分離與確認?(可選但常用):將復發酵陽性的培養物接種于伊紅美藍(EMB)瓊脂平板上,于44.5℃培養18–24小時。觀察是否形成具有?深紫黑色金屬光澤?的典型菌落,并通過革蘭氏染色和顯微鏡檢查進行最終確認?。
該方法通過統計不同稀釋度下陽性管的數量,查?最可能數(MPN)表?,最終計算出每100mL或每升水樣中的糞大腸菌群數量??。
需注意水利行業標準《水質 糞大腸菌群的測定 多管發酵法》(SL 355-2006)曾長期使用,其操作流程與HJ 347.2-2018基本一致,但當前環境監測領域已統一采用發布的HJ標準?。
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